전수컷 자성발생성 킹넙치 생산

Abstract

본 연구는 전암컷 3배체 집단을 생산하기 위해 전수컷 자성발생성 킹넙치를 유도하였다. 킹넙치의 세포유전학적 특성을 분석한 결과, DNA 함량은 0.71 pg/haploid cell로 나타났고, 적혈구의 핵의 장경 및 단경은 3.62±0.14 μm 및 2.40±0.11 μm, 표면적 및 부피는 6.83±0.44 μm2 및 10.97±1.14 μm3으로 확인되었다. 또한 킹넙치의 염색체는 일반 넙치와 동일하게 2n=48개로 확인되었고, Ag-NORs 분석에서 24쌍의 차단부 염색체(acrocentric chromosome) 중 가장 크기가 큰 한쌍의 차단부 염색체의 장완 중간부위가 NOR positive로 확인되었으며, 암·수간 및 개체간의 차이는 나타나지 않았다. 자성발생성 2배체는 자외선 조사법(4,000-4,500 erg/mm2)을 이용하여 유전적 불활성화된 정자와 정상 난을 인공수정한 뒤, 수정란을 2℃에서 45분간 저수온 처리함으로써 생산되었다. 수정 후 46-48시간 후, 자성발생성 2배체 처리군의 부상란 717알 중 정상적인 난발생을 하는 배체는 621알, 반수체 특징을 가지는 배체는 96알로 약 86.6%의 유도율을 보이는 것으로 확인되었다. 자성발생성 2배체 처리군의 DNA 함량 및 염색체 수는 대조군과 동일하게 0.71 pg/haploid cell 및 2n=48개로 관찰되었으며, 적혈구 핵의 표면적 및 부피는 6.4±1.0 μm2 및 10.1±2.3 μm3으로 나타났다. 전수컷 자성발생성 2배체 생산을 위해 부화 후 37일부터 40일간 웅성화 호르몬 첨가사료(17α-methyltestosterone 1 μg/g) 공급과 고수온 처리(25℃)를 수행하였고, 이들의 성전환 여부를 확인하기 위해 부화 후 6개월 된 12개체를 무작위로 채집하여 조직학적 분석을 실시한 결과, 정소는 외형상으로 일반 넙치 수컷과 차이가 관찰되지 않았고, 정소 조직 내에 성숙한 정자들이 존재하는 것이 확인되었다. 앞으로 유도된 전수컷 자성발생성 2배체 킹넙치를 이용하여 전암컷 3배체 집단을 대량 생산할 수 있을 것으로 사료된다.