Development and Validation of Simultaneous Analysis for Maltooilgosaccharides and Isomaltooligosaccharides

Abstract

Charged aerosol detector (CAD)는 발색단이 없거나 자외선을 흡수하지 않는 화합물을 감지 할 수 있기 때문에 응용 범위가 넓고, 광학적 또는 이온화 특성에 크게 의존하지 않으며, 감도와 재현성이 우수하고, 경사 용출 호환성과 같은 장점이 있다. 말토올리고당 (Maltooligosaccharides, MO)과 이소말토올리고당(Isomaltooligo-saccharides, IMO)은 식품으로서 다양한 기능을 가지고 있다. 그러나 MO 및 IMO를 분석하는 방법은 확립되지 않았으며, 정확한 정량분석에 제한이 있다. 따라서, 본 연구는 HPLC-CAD를 사용하여 MO (DP2-6) 및 IMO (DP2-6) 분석을 위한 동시 분석 방법을 수립하고 검증을 통하여 신속하고 정확한 분석법 개발을 목표로 하였다. 아미노컬럼(HILICpak VG-50 4E) 및 CAD를 분석에 사용하였다. 이동상으로는 아세토니트릴(acetonitrile, ACN)과 물로 구성되었으며, 기울기 용리 조건으로는 ACN을 0분에서 50분까지 80%에서 66% 감소되고, 50분에서 60분까지 66%에서 60%로, 60분에서 60.10분까지 60%에서 80%로, 60.10분에서 65분까지 80%로 변화되도록 하였다. 유속은 0.7 mL/min, 컬럼 오븐 온도는 40°C, 시료 주입량은 5 μL로 분석조건을 설정하였다. CAD의 분석 조건은 증발기 온도는 40℃, 데이터 수집 속도는 5 Hz로 설정하였다. 직선성은 상관 계수(R2)로 표현하였으며, 모두 0.99 이상을 나타내었다. 검출한계(Limitied of detection, LOD)와 정량한계(Lim-ited of quantitation, LOQ)는 각각 3-12 ppm과 8-32 ppm이었다. 일내 및 일간 정확도는 93.6±2.3-109.5±0.4%로 나타내었으며 실험간에 유의적인 차이가 없었다(p<0.05). 정밀도는 1.70-4.07%로 나타내었다. 새롭게 개발된 방법은 검증절차를 통해 MO와 IMO의 동시 분석에 적합하였다.