The effect of miR-218a on the translation of PKCβⅠ in oliva flounder (Paralichthys olivaceus)
- Alternative Title
- 넙치 유래 miR-218a가 단백질 인산화효소 C βⅠ의 단백질 발현양에 미치는 영향
- Abstract
- 넙치는 한국에서 널리 양식되는 어종 중 하나이다. 양식산업이 지속적으로 발전하고 있지만 여전히 질병 방제는 문제점으로 남아있다. 마이크로 RNA는 번역되지 않는 짧은 RNA로 메신저 RNA의 번역을 조절한다. 또한, 면역 및 질병과 관련되어있다. 단백질인산화효소 C는 많은 신호전달경로와 연관되어있는데 그 중, 획득면역과 관련된 B 세포수용체 경로에 관여한다. 정량분석을 통해 단백질인산화효소 C의 기질을 넙치의 단백질인산화효소 C 베타 Ι으로 예측되는 단백질이 인산화를 할 수 있는지 확인하였다. 5.7 nM의 농도에서 pol-miR-218a는 넙치의 단백질인산화효소 C 베타 Ι의 단백질 발현을 억제하지 않았다. 아마도 이러한 결과는 형질주입으로부터 지난 시간, 3’-UTR의 길이, 마이크로 RNA 유사체의 처리농도와 관련이 있을 것이다.
- Issued Date
- 2020
- Awarded Date
- 2020. 2
- Type
- Dissertation
- Keyword
- microRNA Protein Kinase C oliva flounder
- Publisher
- 부경대학교
- Alternative Author(s)
- Jun Young Chae
- Affiliation
- 부경대학교 대학원
- Department
- 대학원 생물공학과
- Advisor
- 이형호
- Table Of Contents
- 1. Introduction 1
2. Materials and Methods 3
2.1. RNA extraction & cDNA synthesis 3
2. 2. Phylogenetic tree 3
2.3. Vector construction for cloning PoPKCβⅠ’s ORF and 3’-UTR 4
2.4. SDS-PAGE and Western blotting 5
2.5. Activity assay 6
2.6. microRNA target prediction 6
2.7. Cell culture 7
2.8. Transfection 7
2.9. qPCR 7
2.10. FACS 8
3. Results 9
3.1. Phylogenetic tree 9
3.2. Expression and purification of recombinant PoPKCβⅠ 9
3.3. Activity assay 10
3.4. miRNA target prediction 10
3.5. Analysis of mRNA and protein expression level 10
4. Discussion 11
References 34
Acknowledgment 36
- Degree
- Master
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