유래가 다른 물곰팡이병 원인균의 동정과 약물 효과
- Alternative Title
- Identification and chemical effect on the fungi isolated from freshwater fishes and salmonid eggs
- Abstract
- 2005년 11월에 연어 수정란 (FP9001), 2007년 5월에 누치 (FP9009), 2011년 12월과 2012년 2월에 무지개송어 수정란 (FP9010, FP9011), 생이새우 (FP9012)에서 물곰팡이를 실험에 사용하였다. 이 시험 균주는 양양군의 부화장, 태화강, 옥천군과 상주군의 부화장에서 분리하였다. 분리 곰팡이의 분류 결과, 모든 분리 균주가 무격벽 균사를 갖기에 난균문 (Division Oomyceta)에 속하는 것을 확인하였다.
complete SSU (small subunit) 18S ribosomal RNA, complete ITS (internal transcribed spacer) region과 partial LSU (large subunit) 28s rRNA를 sequencing하여 FP9001는 S. hypogyna, FP9011 및 FP9012 균주는 S. parasitica, FP9009는 S. ferax, FP9010은 Leptolegnia sp.로 동정하였다.
분리 균주를 GY 배양법으로 다양한 약물의 성장 억제 효과를 측정한 결과, 사용금지 약물인 malachite green의 약물 효과를 별개로 하면, hydrogen peroxide, bronopol 그리고 formalin 순으로 효과가 높게 나타났다. 천연물질인 제주송이는 균사로부터 2차 피낭체 발아의 억제를 유도하며 균사 성장을 억제하는 것으로 사료되었다.
Leptolegnia sp. (FP9010)는 우리 나라에서 처음으로 분리된 종으로서 S. parasitica와 S. ferax 에 비해 성장이 빠르며 시험 약물에 대한 저항성이 높게 나타났다.
In this study, five strains of water mold, FP9001 isolated from Oncorhynchus keta egg, FP9009 from Hemibarbus labeo, FP9010 and FP9011 from Oncorhynchus. mykiss egg and FP9012 from Paratya compressa were employed. The strains were taken from the hatchery in Yangyang, the Taehwa river, the hatchery in Okcheon and Sangju and Gijang, Korea in 2005, 2007, 2011 and 2012, respectively.
All strains were belonged in the division Oomyceta because of having aseptic hyphae.
The sequence of the small subunit (SSU) 18S ribosomal RNAs, internal transcribed spacer (ITS) regions and large subunit (LSU) 28S rRNAs of the isolates confirmed that FP9001 is S. hypogyna, FP9011 and FP9012 are S. parasitica, FP9009 is S. ferax, FP9010 is Leptolegnia sp.
The chemotherapeutic effects of various chemicals on isolates were assessed from the inhibitory effects of growth in GY media. Malachite green, a prohibited substance in food animals, was better than others, such as formalin, bronopol, hydrogen peroxide and sodium chloride. Jejuscoria was somewhat effective on that isolates control for hyphae formation by the germination inhibition of second cyst.
In this study, Leptolegnia sp. was known as firstly isolated fungus in Korea. This species showed faster growth and higher resistant to the tested chemicals than S. parasitica and S. ferax.
- Author(s)
- 엄용환
- Issued Date
- 2012
- Awarded Date
- 2012. 8
- Type
- Dissertation
- Publisher
- 부경대학교
- URI
- https://repository.pknu.ac.kr:8443/handle/2021.oak/25237
http://pknu.dcollection.net/jsp/common/DcLoOrgPer.jsp?sItemId=000001965120
- Alternative Author(s)
- Eom, Yong Hwan
- Affiliation
- 부경대학교 대학원
- Department
- 대학원 수산생명의학과
- Advisor
- 박수일
- Table Of Contents
- Ⅰ. 서론 1
Ⅱ. 재료 및 방법 4
1. 분리 시료 및 분리 균주 4
2. 배양 및 배양배지 4
3. 형태학적 시험 6
4. 생리학적 특성조사 6
4.1. 온도에 따른 균사체 성장 6
4.2. pH에 따른 균사체 성장 6
5. 계통학적 분석 7
5.1. 곰팡이의 genomic DNA 추출 7
5.2. Primer의 제작 7
5.3. PCR에 사용한 시약과 PCR 수행 8
5.4. Cloning 과정 11
5.5. Plasmid의 정제, sequence 분석 및 염기 서열의 비교 분석 11
6. 약물효과 측정 12
Ⅲ. 결과 14
1. 형태학적 관찰 14
2. 무성생식의 관찰 16
3. 유성생식의 관찰 18
4. 생리학적 특성 조사 18
4.1. 온도에 따른 균사체 성장 18
4.2. pH에 따른 균사체 성장 21
5. 계통학적 분석 23
5.1. small subunit (SSU) 18s rRNA 분석 23
5.2. LSU 28s rRNA 분석 24
5.3. internal transcribed spacer (ITS) region 분석 25
6. 약물효과 측정 27
Ⅳ. 고 찰 31
Ⅴ. 요 약 36
감사의 글 37
참고문헌 39
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- Master
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